MOB: | 2009/3 |
Szerzők: | Csánky Eszter; Olivova, Petra; Rajnavölgyi Éva; Hempel, William; Tardieu, Nadege; Élesné Tóth Katalin; Jullien, Anne; Malderez-Bloes, Carole; Kuras, Mariana; Duval, Manuel X.; Nagy László; Scholtz Beáta; Hancock, William; Karger, Barry; Guttman András; Takács László |
Tárgyszavak: | COPD; DIAGNÓZIS, LABORATÓRIUMI |
Folyóirat: | Tüdőgyógyászat - 2009. 3. évf. 7. sz. |
COPD-biomarkerek felfedezése és előzetes igazolása egy lépésben / Csánky Eszter [et al.]
Bibliogr.: p. 12-13. - Abstr. hun.
In: Tüdőgyógyászat. - ISSN 1788-697X. - 2009. 3. évf. 7. sz., p. 4-13. : ill.
A COPD világszerte óriási népegészségügyi problémát jelent mind a fejlett, mind a fejlődő országokban. Jelen munkánkban egy monoklonális antitest-termelés talaján globális proteomikai stratégiáról számolunk be, amely során a COPD azonosítására alkalmas proteinbiomarkerek felfedezése és validálása történik. Két, tisztán klinikailag megkülönböztethető betegcsoportot használtunk a biomarker-vizsgálatainkhoz, amelyekben dohányos férfiak vettek részt: harmincan a COPD II. stádiumába tartoztak, és másik harminc dohányos férfi képezte a kontroll-csoportot. Affinitás-kromatográfiával tisztítottuk a plazmát. A tisztított plazmát használtuk monoklonális antitest előállításra. A moklonális antitest előállításra BALB/c egereket, SP2/Ag0 sejteket használtunk. Összesen 3500 hybridoma-felülúszót generáltunk, és ELISA-val szűrtünk. A kiválasztás feltétele az volt, hogy a kötődési különbség nagyobb legyen, mint 25% az egészséges kontroll és a COPD-ben szenvedő beteg között. Első lépésként 250 biomarkert találtunk, amelyeket kompetitív gátlási assay-vel teszteltünk az egyes plazma-mintákon. A második szűrőlépésben csökkentettük a feltételezett biomarkerek számát, amely 10 jó minőségű biomarkert eredményezett. A Mann-Whitney-teszttel vizsgálva mind a 10 talált biomarker statisztikailag nagyon szignifikánsan megkülönbözteti a kontroll és a COPD-s beteget. A globális monoklonális antitest alapú proteomikai stratégia alkalmas proteinbiomarkerek azonosítására, és a proteinbiomarkerek ELISA-vizsgálattal történő azonosítására, így akár azonnal konvertálható klinikai laboratóriumi assay-k. Az új biomarker-assay-k szolgálhatják a COPD korai diagnosztikáját esetleg a korai tünetek megjelenése előtt, alkalmasak lehetnek a kezelés hatására bekövetkező változások észlelésére, és segíthetnek felismerni azt a betegcsoportot, amelynek tagjai a kezelésre jól reagálnak.